件。
?在低营养条件下观察NSCLC细胞HLF对葡萄糖、脂肪酸和蛋白质的影响。如补充图6A，HLF表达的改变并不影响总蛋白含量。然而，HLF的上调降低了葡萄糖、甘油三酯的消耗和乳酸的分泌，但增加了游离脂肪酸的水平(图4F–I)。
?矛盾的是，上调HLF增加了细胞内ATP的总产生和LDH的活性(补充图6B和C）。这些发现表明，在低营养条件下，过表达HLF的癌细胞更容易发生有氧代谢而不是厌氧代谢，这进一步支持了上调HLF降低乳酸脱氢酶(LDH)的活性，厌氧糖酵解限速酶，一些厌氧糖酵解和乳酸发酵相关基因，但增强了多个三羧酸循环相关基因(。
?相反，沉默HLF则表现出相反的代谢特性，促进了NSCLC细胞的厌氧代谢(图4F-I和补充图6C和D)。上诉结果表明，低表达HLF促进非小细胞肺癌细胞的厌氧代谢。
?事实上，即使在氧含量正常的情况下，癌细胞也表现出葡萄糖代谢特征的改变，更倾向于无氧代谢，这一现象被称为“瓦伯格效应”。综上所述，我们的结果表明，低表达HLF可促进NSCLC细胞从三羧酸循环向厌氧代谢的首选代谢途径的转换，从而进一步促进细胞在低营养条件下的生长。
?为了进一步确定低营养条件下HLF抑制NSCLC生长和转移的潜在机制，我们将多个信号通路的荧光素酶报告质粒转染到NSCLC细胞中。如图5A所示，上调HLF显著增强了NSCLC细胞PPAR信号活性，抑制了NF-κB信号活性;相反，沉默HLF则产生相反的效果(图5A)。
?基于TCGA的NSCLC数据集中HLF的表达进行了基因集富集分析(GSEA)，结果显示HLF的表达水平与PPAR信号呈正相关，而与NF-κB信号呈负相关。根据GSEA分析，HLF表达与脂质氧化和糖酵解显著相关(补充图6F)。
?重要的是，一些证据表明，HLF通过增加脂解诱导的游离脂肪酸积累，参与PPAR的易位和激活，通过破坏p65与靶DNA的结合，NF-κB信号通路广泛参与了癌症的进展和转移。PPAR信号通路由PPARα、PPARβ/δ和PPARγ等几个家族成员组成。因此，确定参与HLF抑制NF-κB信号通路以及NSCLC肿瘤发生和转移的特异性PPAR成员至关重要。
?首先，检测10对NSCLC组织中PPARα、PPARβ/δ和PPARγ的表
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